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上海凱創生物技術有限公司

大便隱血的檢測

更新時間:2019-04-25 09:18:28  推薦指數:

  隨著醫學的飛速發展,各種高大上的新檢查和新項目大量涌現;但在實驗室檢查中,有些不起眼的“老”檢查卻不可或缺、歷久彌新——比如大便隱血。

  大便隱血除了可以對有明顯胃腸道出血病史的患者進行監測外,在胃腸道腫瘤篩查預警、抗凝劑使用過程中的出血監測等方面都有著非常重要的意義。因為它的靈敏、快捷、廉價,在臨床上應用廣泛。

  不少醫生對“大便隱血”還留有課本上“檢測前三日禁食動物血液內臟”的印象,擔心飲食因素會引起大便隱血檢測的不準確,實驗室也經常收到類似的臨床咨詢;其實原因還是在于以往大便隱血多用“聯鄰甲苯胺”法(即化學法)檢測,影響因素頗多。然而隨著大便隱血的方法不斷改進,現在其檢測方法主要為免疫膠體金法,基本取代了以往的化學法。

  接下來,說說大便隱血的檢測

  以往的“化學法”多為鄰聯甲苯胺法,其原理是利用血紅蛋白中的亞鐵血紅素的過氧化物酶活性,催化過氧化氫放出新生態氧,把受體鄰聯甲苯胺氧化成聯甲偶氮苯而顯色。顯色的深淺反映了Hb的多少,即出血量的大小。該法可檢出1~5mg/L的Hb,消化道5~10ml出血即為陽性。由其檢測原理即可知:該方法缺乏很好特異性和準確性,易出現假陽性反應,任何有類似氧化物酶活性的物質都可影響此實驗:外源性動物食品如含有Hb、肌紅蛋白,其含鐵血紅素的作用可使試驗陽性;大量生食富含葉綠素蔬菜,其中含有活性的植物過氧化物酶也可催化過氧化氫分解出現陽性反應。故目前多數實驗室已不用化學法作為大便隱血的檢測方法,僅作為補充實驗。

  膠體金法則是用免疫法檢測人血紅蛋白或轉鐵蛋白抗原。在檢驗試紙條的檢測線包被有抗人血紅蛋白(或轉鐵蛋白)抗體,質控線包被有羊抗鼠IgG抗體,在檢測試紙條加樣的一端固定有另一抗人血紅蛋白(或轉鐵蛋白)單克隆抗體標記的膠體金顆粒。經收集處理的標本與膠體金顆粒混合后,如存在人血紅蛋白(或轉鐵蛋白)時,樣品有Hb會與和膠體金上的抗體結合,可在檢測線上出現紅色色帶。它只特異地針對人Hb和Tf的抗原表位,基本排除了飲食及藥物因素的干擾;且具有很好的靈敏度,一般Hb為0.2 ug/ml就可得到陽性結果,Tf最低40ug/ml即可檢出。

  膠體金法中的“血紅蛋白”和“轉鐵蛋白”的應用各有側重,互為補充。血紅蛋白用來檢測隱血“天經地義”,可檢出下消化道任何部位的出血;轉鐵蛋白主要存在于血漿中,在健康人的糞便中幾乎不存在,而在消化道出血時的糞便中大量存在。因上消化道的出血經消化酶作用后,其紅細胞基質盡被消化,血紅蛋白抗原性通常消失,不再有免疫反應,而轉鐵蛋白穩定性明顯高于血紅蛋白,此時可以作為有力的補充檢出陳舊的上消化道出血。用兩種免疫學方法同時檢測兩種抗原,能夠起到互補作用,對初步鑒別消化道出血部位,也具有一定臨床意義。

  檢測方法一多,在臨床上就難免會出現“不一致”的情況,常見的如下。

  化學法與免疫法(膠體金)不一致

  化學法靈敏性低于膠體金法,故極少量的出血會造成鄰聯甲苯胺法(陰性)膠體金法(陽性)的結果,此時糞便外觀通常無明顯異常。

  但如果血紅蛋白在消化道停留時間過長,或受細菌分解等因素而降解,其與膠體金試紙上包被的抗體的相應抗原受到破壞時就會出現假陰性,若此時出血量在鄰聯甲苯胺法檢測限上就會出現鄰聯甲苯胺法陽性而血紅蛋白法陰性的結果。另外當出血量大于膠體金法檢測范圍,隨著血紅蛋白含量增加,抗原抗體復合物反而減少,產生后帶效應,免疫膠體金法出現假陰性,上述兩種情況大便外觀通常會有明顯改變,常為典型的柏油樣便,只需將糞便溶液調配成一定濃度后檢測,免疫膠體金法可獲陽性結果。

  臨床上最多見的還是由于飲食的影響(動物血、內臟、葉綠素),使得化學法呈現假陽性,而免疫法陰性的情況,大便外觀無明顯異常,此時應以免疫法判斷為準。

  血紅蛋白法和轉鐵蛋白不一致

  常見的是Hb-,Tf+。常見于陳舊的上消化道出血,Hb抗原性經由消化消失,Tf較為穩定而呈現陽性結果;另外比較常見的是一些腹瀉患者的大便,由于可能伴隨血漿蛋白滲出,而使得轉鐵蛋白呈陽性反應,一般僅為“弱陽性”。

  比較少見的情況是Hb+,Tf-。如果患者有明確的消化道出血病史,潛血出現了OB+,TF-的結果,考慮此次試驗所取標本中出血較為微量,由于Hb的檢測下限是0.2 ug/ml,而TF為40ug/ml,敏感度不如Hb,不足以檢測出更為微量的出血,建議重新取樣,盡量取外觀顏色異常的部位,并持續觀察。另外還要結合患者本身的血漿Tf水平,如果血漿水平很低,那么也有可能使得出血大便中的Tf濃度太低而檢測不出。

大便隱血檢測試劑條
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